近日，植物保护学院李向东教授团队在《plant biotechnology journal》在线发表了题为“epitope mapping and a cocktail of monoclonal antibodies to achieve full detection coverage of potato virus y”的研究论文。该研究筛选到识别马铃薯y病毒（potato virus y，pvy）衣壳蛋白（coat protein，cp）不同表位的4个单克隆抗体，并得到了能检测所有pvy分离物的单克隆抗体组合。
血清学方法在植物病毒的检测中起着至关重要的作用。但是，多克隆抗体可能会与非靶标病毒发生交叉反应，导致出现错检。单克隆抗体具有更高的特异性，但有些单克隆抗体只能检测到部分病毒分离物，导致漏检现象。pvy是马铃薯y病毒属（potyvirus）的代表种，主要侵染马铃薯、烟草、辣椒、番茄等茄科作物，严重影响作物产量和品质。之前研究表明，利用国际上广泛使用的pvy单克隆抗体mab1128、mab1129和mab1130检测时，20.10%、48.57%和12.73%的pvy分离物会出现漏检现象。
研究人员从54个单克隆抗体中筛选到4个识别不同表位的单克隆抗体n1、m1、m2和c1。通过删除突变以及丙氨酸扫描等分析，确定n1、m1、m2和c1识别的最小表位分别为4tidaggstk12，37gtsgthtvp45，89qfdtwye95和261llgvkn266。这四个单克隆抗体识别的抗原表位与国际上广泛使用的pvy单克隆抗体mab1128、mab1129和mab1130不同，而且在pvy cp中相对保守。截至2022年4月12日，genbank中有1885个pvy cp序列，含有n1、m1、m2和c1识别表位的pvy分离物个数分别为694、1853、1843和1851。将检测范围较广的m1、m2和c1进行组合，发现m1和m2组合可检测所有1885个pvy分离物，m1和c1组合可检测1883个pvy分离物，m2和c1组合可检测1876个pvy分离物。该研究通过将识别cp不同抗原表位的单克隆抗体进行科学组合，实现了所有分离物的全覆盖检测。这种方法可应用于其它植物病毒和动物病毒所有分离物的检测，可有效防止漏检现象。
图1 单克隆抗体的抗原表位鉴定及可检测所有pvy分离物单抗组合的确定
山东农业大学硕士研究生赵翠玲、朱青和牟修岐为共同第一作者，李向东教授和闫志勇博士为共同通讯作者，耿超副教授、田延平教授和原雪峰教授参与了研究工作。该研究受到国家自然科学基金国际合作重点项目(31720103912)以及山东省泰山学者建设工程(ts201712023)的资助。
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编 辑：万 千
审 核：贾 波
